产品货号：
SK043-2
中文名称：
蛋白羰基检测试剂盒(紫外分光光度法)
英文名称：
产品规格：
50管/24样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志，其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小，是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
羰基与2,4-二硝基苯肼反应生成红色2,4-二硝基苯腙，在370nm处有特征吸收峰。
| 组分 | 规格 |
| 提取液：液体 | 50mL |
| 试剂一：粉剂 | 0.1g×5 |
| 试剂二：液体 | 20mL |
| 试剂三：液体 | 20mL |
| 试剂四：液体 | 25mL |
| 试剂六：液体 | 100mL |
保存：2～8℃，避光，有效期3个月。
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、紫外分光光度计、1mL石英比色皿和蒸馏水，无水乙醇，乙酸乙酯。
试剂一：使用前根据样品数，每支加1mL水溶解，每支为10个样品用量。
试剂五：根据测定样品量，将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。
- 试剂一使用之前根据要测定的样品数现配，配置好后4℃保存，若变为黑色，则不能使用。
- 试剂二见光易分解，反应需严格避光。
- 组织样本：按照组织质量(g)∶提取液体积(mL)为1∶5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，于4℃，4000g离心10min，取上清，加入0.1mL试剂一，室温放置10min，4℃，10000g离心10min，取上清待测。
- 细菌、真菌样本：按照细胞数量（104个）：提取液体积(mL)为500~1000∶1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
- 血清等液体样本：直接测定。
按下表依次加入各成分并进行相应操作。
| 成分(mL) | 对照管 | 测定管 | 操作次数 |
| 样品 | 0.2 | 0.2 | 1 |
| 试剂二 | 0.4 | ||
| 试剂三 | 0.4 | ||
| 混匀，37℃避光反应1h。 | |||
| 试剂四 | 0.5 | 0.5 | |
| 静置5min，4℃，12000g离心15min，弃上清，留沉淀。 | |||
| 试剂五 | 1.0 | 1.0 | 3 |
| 漩涡混匀，4℃，12000g离心10min，弃上清，留沉淀。 | |||
| 试剂六 | 1.0 | 1.0 | 1 |
| 漩涡混匀，37℃温育15min，沉淀全部溶解后，4℃，12000g离心15min，取上清，1mL玻璃比色皿，试剂六调零，分别记录370nm对照管和测定管在的吸光值，ΔA370 =A370测定管－A370对照管 | |||
- 按照样本蛋白浓度计算
蛋白质羰基含量(μmol/mg prot)=[ΔA370×V反总÷(ε×d)]÷(V样×Cpr)=0.227×ΔA370÷Cpr - 按照样本重量计算
蛋白质羰基含量(μmol/g鲜重)=[ΔA370×V反总÷(ε×d)]÷(W×V样÷V样总)=0.227×ΔA370÷W - 按照细胞数量计算
蛋白质羰基含量(μmol/104cell)=[ΔA370×V反总÷(ε×d)]÷(细胞数量×V样÷V样总)=0.227×ΔA370÷细胞数量 - 按照液体体积计算
蛋白质羰基含量(μmol/mL)=[ΔA370×V反总÷(ε×d)]÷V样=0.227×ΔA370
V反总：反应体系总体积，1mL；ε：羰基微摩尔消光系数，22×10-3L/μmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.2mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL，W：样本质量，g
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